Plum pox virus (ppv, sharka) es un factor limitante para la produccion de prunus en aquellas areas que se ven afectadas. En el caso del melocotonero aunque no hay fuentes naturales de resistencia descritas, estudios recientes han demostrado que el injerto de la variedad de almendro garrigues sobre plantas de melocotonero gf305 (indicador biologico muy susceptible a ppv) muy infectadas con ppv reduce progresivamente los sintomas de la enfermedad y la acumulacion de virus. Esta respuesta parece ser especifica entre almendro y melocotonero. Ademas, el injerto de garrigues en gf305 antes de la inoculacion con ppv previno completamente la infeccion de este, lo que demuestra que la resistencia es constitutiva y no inducida por el virus. En un proyecto anterior (AGL2010-16335) fueron analizadas las diferencias en la expresion genica despues de la infeccion de ppv en hojas de melocotonero gf305 mediante secuenciacion masiva de mrna (rna-seq). Los resultados obtenidos mostraron que la respuesta temprana a la infeccion por el virus, en hojas de melocotonero sin sintomas procedentes de plantas infectadas con ppv, esta asociada a una induccion de genes relacionados con la resistencia a patogenos como acido jasmonico, proteinas de resistencia, quitinasas o proteinas lys-m. En cambio, cuando el virus se habia instalado se observo una sobreexpresion de genes dicer protein 2a que podian evidenciar una respuesta de silenciamiento genico de la planta suprimida mediante las proteinas hcpro y p1 de ppv. En este proyecto se pretende analizar la regulacion de la expresion genica de la resistencia a ppv transmitida mediante injerto entre especies del genero prunus estudiando cuatro tratamientos diferntes. En primer lugar se analizaran plantas control de melocotonero gf305y plantas inoculadas con ppv mostrando sintomas de sharka. Estos estudios ya se han llevado a cabo en el proyecto anterior a nivel de mrna y se completaran a nivel hormonal y de mirna. Posteriormente se procedera a la injerta de la variedad de almendro garrigues en las plantas control e infectadas. En estas plantas se intentara identificar el mecanismo de defensa sistemico frente a ppv inducido mediante injerto del almendro garrigues en melocotonero, asi como la molecula efectora que puede estr interviniendo, realizando un analisis de expresion diferencial a nivel hormonal y mediante secuenciacion masiva de mrna (mrna-seq) y mi rna (mirna-seq). Los datos a nivel de mrna-seq y mirna-seq seran validados mediante qpcr en diferentes plantas de gf305 y garrigues
Palabras Clave / Keywords
- interación planta-virus
- mirna
- mrna
- perfil hormonal
- prunus
- regulación génica
- secuenciación de transcriptomas
- sharka
- silenciamiento génico
- ppv