En los ultimos 3 años nuestro equipo de investigacion ha desarrollado el proyecto AGL-2010-18493, en el que hemos aislado el patogeno emergente clostridium difficile (cd) de diferentes especies animales en nuestro pais. Es por ello que disponemos en nuestro laboratorio de una coleccion de mas de 400 cepas con muy diferentes caracteristicas en cuanto a su ribotipado y antibiorresistencia. Esto hace que estemos listos para dar un paso mas en nuestras investigaciones, estableciendo un estudio trasversal en sus metodologias y trasversal en sus finalidades, que nos permita establecer criterios objetivos para minimizar el potencial zoonosico del patogeno emergente clostridium difficile. Para ello proponemos inicialmente un estudio de las caracteristicas genotipicas que delimitan la resistencia a antibioticos de cd, con estudios de secuenciacion sobre genes especificos de resistencia a antibioticos, con insistencia en estudios genotipicos en las cepas antibiorresistentes de que disponemos. Este estudio se realizara de forma trasversal con la busqueda de una metodologia robusta de clasificacion de cepas dentro de la especie. El procedimiento mas utilizado en la actualidad es el ribotipado, del que no se obtiene una buena diferenciacion, por cuanto que nosotros mismos hemos observado como cepas incluidas en un mismo ribotipo presentan claras diferencias fenotipicas y de antibiorresistencia. Esto obliga a la busqueda de metodos alternativos. Los resultados obtenidos en esta primera parte de la investigacion seran aplicados a un tema sanitario de gran interes, mediante un estudio de la presencia de cd en animales, concretamente en ganado porcino, tanto lechones como animales criados en intensivo de 6 meses de edad, y cerdos ibericos de 14-16 meses de edad, desde su estancia en la granja hasta que llegan al consumidor, lo que nos permitira delimitar si las cepas presentes en la granja son las mismas que aparecen en el producto carnico final, o aparecen contaminantes de otros origenes. Finalizaremos nuestras investigaciones con estudios de patogenicidad de cepas mediante la investigacion de posibles infecciones policlonales, cuantificacion de la capacidad de produccion de toxinas por diferentes cepas de cd asi como los factores que influyen en dicha produccion, y la capacidad de crecimiento competitivo entre cepas con caracteristicas variables dentro de cd. Con todo ello esperamos conseguir metodos que permitan determinan la capacidad patogenica de un determinado aislado, y aun mas alla, la capacidad de riesgo sanitario del mismo en base a antibiorresistencias, produccion de toxinas, supervivencia en el medio ambiente y capacidad para llegar a la especie humana originando una enfermedad de creciente importancia. Y con todo ello cumplir el reto de implementar un sistema robusto de vigilancia epidemiologica de clostridium difficile en explotaciones animales, que permita mejorar el estado sanitario del ganado y su rendimiento productivo, asi como garantizar la seguridad alimentaria.