El alcornoque y la encina, importantes componentes del sistema agroforestal del sur-oeste de la peninsula iberica, son especies seriamente afectadas por el problema de la enfermedad de 'la seca' causada, entre otras factores, por los hongos phytophthora cinnamomi, diplodia mulila y biscogniauxia mediterranea. Este subproyecto se enmarca en la aplicacion biotecnologica basada en el proceso de embriogenesis somatica (es) para alcanzar dos objetivos: 1) transformacion genetica de alcornoque y encina y 2) propagacion de material elite o seleccionado de encina mediante embriogenesis somatica. El primer objetivo se refiere a la obtencion de plantas transgenicas de alcornoque como una valiosa alternativa complementaria de los programas de mejora convencional. Se proyecta la incorporacion de genes que confieren resistencia a enfermedades fungicas, problema que afecta a las especies objeto de estudio. Se utilizaran lineas embriogenicas de origen adulto abordandose la incorporacion de los genes cstl1 (codifica una proteina tipo taumatina) y csch3 (codifica una quitinasa) aislados en castaño y con actividad antifungica, lo que supondria en un futuro disponer de genotipos seleccionados de alcornoque con un valor añadido de resistencia/tolerancia a esta enfermedad. En el caso de la encina, inicialmente solo se abordara la obtencion de lineas embriogenicas transformadas con estos genes ya que los sistemas embriogenicos no estan totalmente definidos para la regeneracion de plantas, aspecto que tambien sera investigado en el marco del proyecto coordinado. En estudios previos, nuestro grupo ha logrado la iniciacion de cultivos embriogenicos de otras especies de roble, de origen adulto, utilizando explantos de cultivos en proliferacion de brotes axilares. Dadas las limitaciones existentes hasta la fecha en los sistemas embriogenicos de encina, incluyendo la induccion de es a partir de estructuras florales, el segundo objetivo de esta propuesta abordara la induccion de es en explantos (hojas y apices caulinares) obtenidos de cultivos de brotes axilares que se estableceran a partir de arboles adultos de encina. Tambien se llevara a cabo un estudio histologico e histoquimico sobre el proceso de induccion de es en encina, con el fin de determinar el origen de las celulas embriogenicas en los explantos iniciales, el desarrollo de las distintas etapas de los embriones somaticos y la posible relacion de la estructura de los embriones somaticos con su capacidad de proliferacion y germinacion. Con el fin de salvaguardar a largo plazo las lineas embriogenicas obtenidas y seleccionadas para su futuro uso, el material sera crioconservado.