La respuesta al estres esta bien caracterizada en sus grandes rasgos en peces y particularmente en la dorada (Sparus Aurata), teleosteo marino de alto valor comercial, cuyo cultivo puede implicar procesos de estres tipicos de la practica acuicola (i.E. Densidad y manipulacion). De este modo, el objetivo general es mejorar los procesos de gestion acuicola en los peces en el modelo de la dorada. Este objetivo se quiere conseguir mediante herramientas de deteccion y de atenuacion del estres en todos los puntos relevantes del eje hipotalamo-pituitario-interrenal (hpi) y sus respuestas. Sin embargo, un elemento importante en relacion a la capacidad de monitorizacion de los estados de estres es que no se dispone en la actualidad de algunos de los marcadores relevantes en la caracterizacion de dicha respuesta. De este modo, se terminaria de completar las herramientas metodologicas (i.E. Clonacion de todos los receptores de cortisol, que constituiria el objetivo especifico 1), asi como el empleo de las nuevas aproximaciones tecnologicas como el uso de microarrays para el estudio del hpi. Asi, en este estudio se abordaran dos situaciones experimentales de interes para la practica acuicola y que constituyen dos de los objetivos especificos del mismo: i) estres cronico por densidad con sustancias que atenuen la activacion del eje hpi (objetivo especifico 2) y ii) estres inducido por transporte y uso de anestesicos bajo dosis de sedacion (objetivo especifico 4) dada ademas la reciente proliferacion de agentes potencialmente anti-estres. Segun el paradigma clasico, el orden de activacion tendria una direccion desde el centro (hipotalamo) hacia la periferia. Sin embargo, la induccion no necesariamente se produce en este orden, sino que puede iniciarse en la periferia, en particular bajo condiciones de presencia de patogenos, parasitos o contaminantes. En estos casos no solamente la induccion de la respuesta del eje empieza en la periferia sino que ya se desarrollan respuestas locales en especial en las mucosas del intestino, piel o branquias que despues, y via mediadores en sangre, activan el eje hpi. El presente proyecto incorpora dos diseños experimentales que contemplan esas nuevas aproximaciones y que constituyen dos de los objetivos especificos del mismo: i) el tratamiento con nanoparticulas (objetivo especifico 3), y ii) el tratamiento con lipopolisacaridos (lps) de bacterias (objetivo especifico 5). El sistema de estres sera estudiado mediante la determinacion de: i) niveles hormonales (cortisol) y metabolicos (glucosa, lactato, etc) en plasma; ii) niveles de metabolitos y actividades enzimaticas en higado; iii) expresion de actividades enzimaticas de estres oxidativo en higado y branquia; iv) expresion de crh, crh-bp y trh en hipotalamo por rt-q-pcr; v) expresion de pomc a y pomc b en hipofisis por rt-q-pcr; vi) expresion de receptores glucocorticoide y mineralcorticoide en diferentes organos del eje hpi asi como en organos metabolicos (higado) y perifericos (branquia, intestino, piel) mediante rt-q-pcr. Finalmente se utilizara la expresion genica en microarray para la consecucion de los objetivos 2 y 4. Las aplicaciones finales de este estudio son importantes, ya que de los resultados podremos obtener informacion susceptible de ser utilizada para una optimizacion del cultivo de s. Aurata en relacion a los procesos de estres. Los autores pretendemos tanto la publicacion cientifica como informes tecnicos para el sector.