Nueva variante del RHDV (RHDV-N11): Estudio de la patogenia y la respuesta inmune en conejos infectados experimentalmente o vacunados.

Descr

"Los objetivos concretos del presente proyecto se enumeran a continuaci�n: Objetivo 1. Estudio de la patogenia de la enfermedad hemorr�gica v�rica producida por la nueva variante del RHDV (RHDV-N11) en conejos infectados experimentalmente. 1.1

Financiacion

Realizaci�n de infecciones experimentales de conejos con la nueva variante del RHDV. Se ha descrito que la enfermedad afecta de forma desigual a gazapos y conejos adultos, por lo tanto, se estudiar� la susceptibilidad al virus en conejos de tres grupos de edad (menores de 35 d�as, de entre 35 y 60 d�as, y mayores de 60 d�as (adultos)). 1.2

Organismo

Monitorizaci�n cl�nica y estudio de la patogenia de la enfermedad. Evaluaci�n de la aparici�n y evoluci�n de los signos cl�nicos espec�ficos de RHD. Valoraci�n anatomopatol�gica de posibles alteraciones en �rganos internos. 1.3

Centro

Investigaci�n del tropismo celular de la nueva variante RHDV-N11. Detecci�n del genoma viral mediante RT-PCR espec�fica y localizaci�n del ant�geno viral mediante inmunohistoqu�mica en distintos tejidos. Para llevar a cabo este objetivo ser� necesario producir un suero hiperinmune anti-RHDV-N11 en cabra. 1.4

Departamento

Realizaci�n de pruebas de uni�n diferencial del virus purificado (virus cl�sico y nueva variante) y VLPs (Virus-Like Particles) a distintos tejidos (h�gado, pulm�n, ri��n, bazo, intestino y coraz�n) procedentes de animales de los tres grupos de edad, en presencia o ausencia de competidores de la uni�n de los ligandos virales a sus receptores celulares. Este objetivo constituye una aproximaci�n al estudio de los receptores virales. Objetivo 2. Estudio de las v�as de propagaci�n del virus. Se investigar� la diseminaci�n del virus en todos los animales mediante el an�lisis por RT-PCR de muestras de suero, heces y secreciones a lo largo del tiempo. Este conocimiento constituye un punto cr�tico para el control de la enfermedad en las granjas cun�culas. Objetivo 3. Caracterizaci�n de la respuesta inmune en conejos j�venes y adultos infectados, vacunados con RHDV cl�sica o vacunados con la nueva variante de RHDV. 3.1 Estudio de la respuesta inmune humoral mediante an�lisis de los niveles de IgGs e IgAs presentes en suero sangu�neo a lo largo del tiempo en animales infectados y vacunados. Se utilizar� un ELISA modificado basado en el uso de VLPs como ant�geno y anticuerpos secundarios espec�ficos de especie conjugados con peroxidasa (AbD serotec). 3.2 Estudio de la respuesta inmune celular mediante an�lisis de los niveles de citoquinas y ensayos de linfoproliferaci�n espec�fica. Objetivo 4. Verificaci�n, en conejas reproductoras vacunadas, de la trasmisi�n de inmunoglobulinas a la leche y a gazapos reci�n nacidos. �Protege la vacunaci�n de las madres reproductoras a los gazapos?"